|
DEVELOPMENT OF SOLID PHASE RADIOIMMUNOASSAY
FOR THYROXINE USING ANTIBODY COUPLED
MAGNETIZABLE PARTICLES
*
MEHANY, N.L. and SHAFIK,
H.M.
Labelled Compounds Dept.,
Hot Labs. Centre, Atomic Energy
Authority, Post No.13759, Cairo, Egypt.
Key words: Solid phase
RIA, Thyroxine, Polyclonal antibodies,
Magnetizable particles.
تطوير طريقة المناعة الإشعاعية ذات الطور الصلب باستخدام الجزيئات
الممغنطة لقياس هرمون الغدة الدرقية رباعى اليود
ناجى لحظى مهنى و
حنان محمد شفيق
خلاصـــة
استهدفت هذه الدراسة وضع تقنية عالية بتكلفة أقل لنظام التحليل المناعى
الإشعاعى
ذات الطور الصلب باستخدام الجزيئات
الممغنطة وذلك للتقدير المباشر لهرمون الغدة الدرقية رباعى اليود. تم تحضير الممنع
لهرمون الغدة الدرقية رباعى اليود ثم إنتاج الأجسام المضادة عديدة
النسيلة والقافى المشع لرباعى اليود
(125I
-T4)
باستخدام الكلورامين
-
ت وأيضا تم تحضير المحاليل العيارية
لهرمون الغدة
الدرقية
رباعى اليود وقد تم تحميل تلك الأجسام المضادة على الجزيئات الممغنطة بعد
تنشيطها واستخدام هذه الجزيئات فى ذلك التقدير.
تم دراسة صلاحية هذه التقنية باستخدام الوسائل المتعارف عليها دوليا
وعمليا لإثبات كفاءتها فى التشخيص المعملى.
أثبتت نتائج الدراسة الحصول على
طريقة قليلة التكلفة وفائقة الحساسية والإختصاصية والدقة مما يرشحها
لتكون مناسبة للتشخيص الروتينى المعملى.
ABSTRACT
The objective of the
present study was oriented to develop, optimize and validate
radioimmunoassay (RIA) system using solid phase-magnetic particles
based on local production of basic reagents for the measurement of
thyroxine (T4) in human serum. The production of polyclonal
antibodies was carried out by immunizing two white
New Zealand rabbits
subcutaneously.
Low density magnetizable
cellulose iron oxide particles were used to couple covalently to the
IgG fraction of polyclonal anti-thyroxine
using carbonyl diimidazole
activation method and applied as a solid phase separating agent for
RIA of thyroid hormone thyroxine in serum.
Preparation of 125I-T4
radioactive tracer was prepared using chloramine-T oxidation method
and was purified using high performance liquid chromatography. In the
last component of the RIA system, T4 standard was prepared
by using the highest purified grade of T4 powder with
hormone free serum as standard matrix. Optimization and validation of
the assay were carried out.
The results obtained
provide a simple, time saving, sensitive, specific and accurate RIA
system of T4 based on magnetizable solid phase separation.
|