STUDIES ON
INDUCED HEPATOTOXICITY IN MALE
ALBINO RATS (RATTUS NORVEGICUS)
( (
ABULYAZID, I., ABBAS, O.A. and FAYEZ, V.
Nuclear Research Centre, Atomic Energy Authority, Cairo, Egypt.
Key words: Aspartate aminotransferase, Alanine aminotransferase , Levanox, Garlic powder, Carbon tetrachloride, SDS-PAGE and RAPD-PCR.
دراسات على التسمم الكبدى فى ذكور الجرذان البيضاء
ابراهيم ابواليزيد و أسامه أحمد عباس و فيولا فايز
خلاصـــة
يعتبر الليفانوكس، وهو من عقاقير حماية الكبد، وكذلك أقراص الثوم المطحونة من العوامل الآمنة ومضادات الأكسدة القوية. و تهدف هذه الدراسة البيوكيميائية و الجزيئية إلى تقييم دور الحماية لمادتى الليفانوكس و أقراص الثوم المطحونة منفردين أو مجتمعين تجاه سمية رباعى كلوريد الكربون المحدثة فى ذكور الجرذان البيضاء.
أثبتت الدراسة أن ٳعطاء رباعى كلوريد الكربون عن طريق الفم بجرعة مقدارها 0.03 مللى/كجم بالنسبة لوزن جسم الجرذ قد ظهر بوضوح فى الزيادة المعنوية للانزيمات الناقلة لمجموعة الأمين فى مصل الجرذ. وقد اتضح أيضا أن المعاملة بمادة الليفانوكس (كبسولة واحدة/كجم من وزن جسم الجرذ وتحتوى كل كبسولة على100 ملليجرام كاتيكو و7.5 ملليجرام داندليون و75 ملليجرام تيرميريك (2% كوركومين) و17.5 ملليجرام سليمارين و100 ملليجرام ليسيثين) كانت أكثر فاعلية بالمقارنة بأقراص الثوم المطحونة (100مجم/كجم من وزن جسم الجرذ) فى اختزال السمية التى يحدثها رباعى كلوريد الكربون والتى ظهرت بوضوح فى منع ارتفاع الانزيمات الناقلة لمجموعة الأمين فى مصل الجرذ.
هذا و عند التحقق من بروتينات الدم فى كل من المجموعة الضابطة و العينات المعاملة بالليفانوكس والثوم و رباعى كلوريد الكربون وجد ان كل منهم ينتج 13 نوعا من البروتين مختلفين عن بعضهم البعض فى الوزن الجزيئى و الكثافة الجزيئية، بينما نتج 14 نوعا من البروتين تختلف فى العينات المعاملة بالثوم + الليفانوكس عن نظيرتها الموجودة فى العينات المعاملة بالثوم + رباعى كلوريد الكربون فى الوزن الجزيئى و الكثافة الجزيئية أيضاً. هذا و قد تمت دراسة معامل التشابه بين العينات المعاملة و الضابطة أيضاً وعند استخدام بادئات التفاعل العشوائية فى تفاعل البلمرة المتسلسل لم ينتج أى تكبير للعينات المعاملة على عكس العينات الضابطة فقد نتج فيها التكبير باستخدام بادئات التفاعل OPA-1, 2, 3, 4 and 5.
وقد تبين من المعاملة بخليط مادتى الليفانوكس وأقراص الثوم المطحونة ظهور بروتين مميز من خلال فصل البروتين الكهربائى وقد تأكدت هذه النتيجة بواسطة اختبار البلمرة المتسلسل لعينات كبد الجرذان المعالجة بخليط الليفانوكس و بودرة الثوم بالمقارنة بالحيوانات الضابطة.
ABSTRACT
Levanox, a hepatoprotective drug, and garlic powder have been considered as safe anti-oxidant agents. The present investigation refers to biochemical and molecular studies to evaluate the protective role of levanox and/or garlic powder toward CCl4-induced toxicity in adult male albino rats. CCl4 intoxication was attempted using a dose of 0.03 ml/kg of rat body weight.
Pre-treatment with levanox (one capsule/ kg of rat body weight, each capsule contains 100 mg catechu, 7.5 mg dandelion, 75 mg termiric "2% curcumin", 17.5 mg silymarin, 100 mg lecithin) was more effective than garlic powder (100mg/kg of rat body weight) in reducing CCl4-induced hepatotoxicity as revealed by its higher potency in reducing elevation of aspartate (AST) and alanine (ALT) aminotransferases in serum. Serum of control rats and those treated with levanox or garlic or CCl4 produced 13 types of proteins, differing in the molecular weight (MW) and densities, while those of levanox + garlic or garlic + CCl4 produced 14 bands differing in the MW and densities. The similarity index at the epigenetic level was also studied using the primers under study. The control sample produced one amplified DNA fragment with Rf of 0.73 and a molecular size (MS) of 67 base pair (bp) . Using the same primers, no amplified DNA fragment with the same MS was produced in the sample taken from levanox + garlic treated group.OPA-2 primer of sequence 5̀- AGA TGC AGC C-3̀ produced one amplified DNA band with MS of 292 bp and Rf of 0.46 . However, the same primer produced one amplified DNA characteristic band with a molecular size of 363 bp and Rf of 0.43 in the sample of levanox + garlic group.
In the control
sample, OPA-4 primer of sequence 5̀ - ACG CAC AAC C-3̀ produced one
amplified DNA band of MS of 299 bp and Rf of 0.43. The same
primer produced one amplified characteristic DNA band with MS of 363 bp
and
Rf of 0.43 in the sample of levanox + garlic group.
Dual treatment with levanox and garlic powder resulted in a characteristic protein differing from that of control as revealed through SDS-PAGE and confirmed by RAPD-PCR.
