IN VITRO INHIBITORY EFFECTS OF GAMMA RADIATION
ON NAJA NIGRICOLLIS SNAKE VENOM INDUCED
HEP-2 CELL INJURY *

ABOUELELLA, A.M.

Radiation Biology Dept., National Centre for Radiation Research
and Technology, Atomic Energy Authority, Cairo, Egypt.

Key words: Naja nigricollis, Venom, Gamma radiation, Apoptosis, Necrosis.

التأثير المثبط معملياً لأشعة جاما على سم الثعبان البخاخ من نوع
ناجا نيجريكوليس والمحدث للإصابة الخلوية فى خلايا HEp-2

أميرة محمد كمال أبوالعلا

خلاصـــة

تم تشعيع سم الناجا نيجريكوليس بأربع جرعات من أشعه الجاما ؛ 1، 5، 20 و 50 كيلوجراى، باستخدام مصدر كوبلت-60  وذلك لدراسة قدرة أشعة جاما لتضعيف سمية الناجا نيجريكوليز على السلسلة الخلوية HEp-2. تم دراسة النخر الخلوى (necrosis) عن طريق اللاكتات ديهدروجينيز و المالونداىالدهيد بينما تم دراسة الإستموات الخلوى (apoptosis) عن طريق تكسير الحمض النووى الديوكسى ريبوزى وأكسيد النيتريك و السيتوكروم- س
و الكاسبيس-3 و البارب-1 .

أشارت النتائج أن أشعة جاما قللت النخر الخلوى الناتج من سم الناجا نيجريكوليس فى معظم الجرعات الإشعاعية خاصة الـ 1 و50 كيلوجراى. وقد أظهر تكسير الحمض النووى الديوكسى ريبوزى تقليل الاستموات الخلوى للسم بعد تعرضه لأشعه جاما، بينما السم المعرض لجرعة
1 كيلوجراى أظهر تقليل أكثر لخروج أكسيد النيتريك أما السم المعرض للجرعة
50 كيلوجراى فأظهر تقليل أكثر لخروج المالونداىالدهيد. وقد أطلق السيتوكروم- س فى الخلايا المعاملة بالسم المشعع بالجرعات المختلفة من أشعه جاما فى حين أن نشاط انزيم الكاسبيز-3 لم يظهر واضحاً إلا فى حالات التشعيع بجرعات 5 و20 كيلو جراى و هذه النتيجة متوافقة مع نشاط البارب-1 عند نفس الجرعات.

ABSTRACT

Naja nigricollis venom was irradiated with four different doses of gamma rays; 1, 5, 20 and 50 kGy, from ⁶⁰Co source. The ability of gamma rays to attenuate the cytotoxic effects of N. nigricollis venom was investigated on HEp-2 cell line. The cell necrosis was measured by lactate dehydrogenase (LDH) and malondialdehyde (MDA) while cell apoptosis was measured by DNA fragmentation, nitric oxide (NO) synthesis, mitochondrial cytochrome-C release and cleavage of both caspase-3 and PARP-1. The results showed that gamma irradiation reduced significantly the necrotic effects of N. nigricollis venom in almost all irradiation doses of venom, especially at 1 and 50kGy. DNA fragmentation showed decreased apoptotic effects after exposing of snake venom to gamma radiation. Venom exposed to 1kGy showed the highest decrease in the NO (47.5±2.4 mM) while the 50kGy showed the highest decrease in the MDA release (11.75±0.6 nmol/ml). The mitochondrial cytochrome-C was released after treatment with all radiation doses while caspase-3 was cleaved in only the cells incubated with radiated venom of 5 and 20kGy which were consistent with the results of PARP-1 cleavage at the same radiation doses.