PREPARATION
OF RADIOIODINATED PROLACTIN
BY CHLORAMINE-T AND HYDROGEN PEROXIDE
METHODS FOR RADIOIMMUNOASSAYS
*
AYYOUB, S.M.
Labelled Compounds Dept., Hot Laboratories Centre, Atomic Energy Authority,
P.O. Box 13759, Cairo, Egypt.
Key words: Radioimmunoassay (RIA), Prolactin (PRL), Chloramine-T (Ch-T) method, Hydrogen peroxide (H2O2) method.
تحضير البرولاكتين المرقم باليود المشع بطريقتى الكلورامين-ت وفوق أكسيد الهيدروجين لاستخدامه فى طرق المناعة الإشعاعية
سامية محمود أيوب
خلاصـــة
تم تحضير البرولاكتين المرقم باليود المشع باستخدام طريقتى الكلورامين-ت وفوق أكسيد الهيدروجين. وقد تم دراسة العوامل المؤثرة على عائد الترقيم مثل تركيز المادة المؤكسدة وزمن التفاعل وتركيز المادة المراد ترقيمها والأس الهيدروجينى للحصول على أعلى عائد ترقيم.
أوضحت النتائج أن الطريقة المثلى لترقيم هرمون البرولاكتين بطريقة الكلورامين-ت كانت بإضافة 10 ميكروجرام من البرولاكتين و 12 ميكروجرام من الكلورامين-ت و زمن التفاعل دقيقة واحدة والأس الهيدروجينى 7.4 . أما بطريقة فوق أكسيد الهيدروجين فيتم إضافة 10 ميكروجرام من البرولاكتين و10 مللى لتر من فوق أكسيد الهيدروجين : حمض الخليك (1:1) وزمن التفاعل 5 دقائق و الأس الهيدروجينى 7.4 . وبعد دراسة مدى ثبات المادة المرقمة باليود المشع لفترة زمنية معينة، ثبت صلاحيتها لمدة 8 أسابيع بعد تحضيرها.
من تلك النتائج يتضح أنه يمكن استخدام البرولاكتين المرقم بنجاح بهاتين الطريقتين فى طرق المناعة الإشعاعية.
ABSTRACT
Radioiodinated prolactin was prepared using chloramine-T and hydrogen peroxide methods. The conditions of radioiodination such as concentration of oxidizing agent, reaction time, concentration of prolactin and effect of pH were studied to get maximum yield. The optimum conditions for radioiodination using chloramine-T method were 10 µg prolactin, 12 µg chloramine-T and 1 minute reaction time at pH 7.4. The optimum conditions for radioiodination using hydrogen peroxide method were 10 µg prolactin, 10 µl hydrogen peroxide: acetic acid (1:1) and 5 minutes reaction time at pH 7.4. Stability studies of prolactin tracers were carried out over a period of time and found to be valid for 8 weeks after preparation. The radiolabelled prolactin prepared by these methods was used in radioimmunoassay.
