IMMUNORADIOMETRIC ASSAY FOR IN VITRO DETERMINATION OF PROLACTIN HORMONE IN HUMAN SERUM OR PLASMA USING SOLID PHASE ANTI-PRL CELLULOSE PARTICLES *
SHAFIK, H.M.
Hot Laboratories Centre, Atomic Energy Authority, Cairo, Egypt.
Key words: PRL, Immunization, IRMA, Solid phase.
تقدير هرمون البرولاكتين فى مصل الدم البشرى بتقنية التحليل المناعى
الإشعاعى ذات الطور الصلب باستخدام جزيئات السليولوز
حنان محمد شفيق
خلاصـة
استهدفت تلك الدراسة إنتاج وتنقية الأجسام المضادة عديدة النسيلة لهرمون البرولاكتين كمكون أساسى لنظام التحليل المناعى الإشعاعى باستخدام جزيئات السليولوز. تم دراسة وضع تلك التقنية وأيضاً مدى كفاءتها وصلاحيتها لتقدير ذلك الهرمون فى مصل الدم البشرى. وقد تم تحضير القافى المشع للهرمون باستخدام طريقة اللاكتوبيروكسيديز وذلك لتقدير الاستجابة المناعية للأرانب وأيضاً تم تحضير المحاليل العيارية لهرمون البرولاكتين وأيضاً تم تنشيط وتبطين جزيئات السليولوز بالجسم المضاد الأولى عديد النسيلة لذلك الهرمون وقد تم تطوير وصلاحية هذه التقنية.
بينت النتائج مدى الاستجابة المناعية العالية لإنتاج الأجسام المضادة عديدة النسيلة لهرمون البرولاكتين. وقد أوضحت نتائج تلك التقنية أن عملية التقدير تميزت بحساسية واختصاصية عالية والحصول على نفس النتائج بتكرار قياس نفس العينات أكثر من مرة سواء فى التقديرات المختلفة أو التقدير الواحد وأيضاً بينت نتائج الاسترجاع والتخفيف أن القياسات دقيقة. وقد بينت النتائج المتحصل عليها من هذه التقنية بما تم الحصول عليه من أحد الطرق المستوردة الموثوق فى نتائجها بالسوق المحلى ارتباط إحصائى معنوى، كما أثبتت النتائج ثبات تلك الجزيئات لمدة ستة أشهر عند درجة حرارة 4 درجة مئوية.
يمكن أن نستخلص من هذه الدراسة أن تلك التقنية الأقل تكلفة تكون مناسبة كوسيلة للمساعدة فى تشخيص أحد أسباب العقم سواء بوجود أورام أو نشاط زائد بالغدة النخامية.
ABSTRACT
The objective of the present study was oriented to produce and purify polyclonal anti-PRL antibody as the main key store in immunoradiometric assay (IRMA) using solid phase cellulose particles for determination of PRL in human sera. The preparation of 125I-PRL was carried out by lactoperoxidase method for estimation of the titre of antibody production. The preparation of standards was undertaken. The activation of cellulose particles using 1,1-carbonyl diimidazole (CDI) and coupling of these solid phase particles with purified rabbit anti-PRL were carried out. Optimization and validation of the assay were carried out.
Results revealed that the produced PRL polyclonal antibodies have high titre. Cellulose particles IRMA system was highly sensitive and specific. The intra- and inter- assay variations were satisfactory. The recovery and dilution tests indicated accurate calibration and appropriate matrix. The present technique agreed well with IRMA commercial kit. These cellulose particles retained their characteristics during storage for 6 months at 4oC. In conclusion, this low cost assay could be used as a useful diagnostic tool for diagnosis and follow-up of galactorrhea, infertility and pituitary adenoma.
