DEVELOPMENT OF
RADIOIMMUNOASSAY FOR
PROLACTIN HORMONE USING SOLID
PHASE MAGNETIC PARTICLES
*
SHAFIK, H.M. and MEHANY, N.L.
Labelled Compound Dept., Hot Laboratories Centre,
Atomic Energy Authority, Cairo, Egypt.
Key words: Prolactin, Immunization, Radioimmunoassay (RIA),
Solid
phase.
تطوير طريقة المناعة الإشعاعية ذات الطور الصلب لقياس
هرمون البرولاكتين باستخدام الجزيئات الممغنطة
حنان محمد شفيق و ناجى لحظى مهنى
خلاصـة
استهدفت هذه الدراسة وضع تقنية لنظام التحليل المناعى الإشعاعى ذات الطور الصلب باستخدام الجزيئات الممغنطة لتقدير هرمون البرولاكتين وذلك بتحضير المواد الأولية اللازمة لهذا النظام والمتمثلة فى إنتاج الأجسام المضادة عديدة النسيلة وتحضير القافى المشع (برولاكتين- يود 125) باستخدام الكلورامين- ت كعامل مؤكسد وأيضاً تحضير المحاليل العيارية لهرمون البرولاكتين وقد تم وصف تبطين الجزيئات الممغنطة النشطة بالأجسام المضادة عديدة النسيلة لذلك الهرمون، وقد تم دراسة صلاحية هذه التقنية باستخدام الوسائل المتعارف عليها لإثبات مدى كفاءتها وقد بينت نتائج الدراسة الحصول على طريقة قليلة التكلفة وفائقة الحساسية والاختصاصية مما يرشحها لتكون وسيلة مناسبة لتشخيص أورام الغدة النخامية وضعف الرؤية والعقم فى الذكور والإناث.
ABSTRACT
The preparation and development of primary reagents of prolactin (PRL) radioimmunoassay (RIA) technique using solid phase magnetic particles with low cost is considered to be the main objective of the present study. The production of polyclonal antibodies was undertaken by immunizing four female New-Zealand rabbits through primary injection and four booster doses subcutaneously. The preparation of 125I-prolactin radiotracer was carried out using chloramine-T. The preparation of standard prolactin was undertaken by preparing stock standard solution of prolactin and diluted with assay buffer. Activation and coupling of low magnetizable particles with the purified anti-PRL was carried out. Optimization and validation of the assay were carried out. The results obtained provide a highly sensitive, specific and accurate RIA system of PRL. In conclusion, this assay could be used in diagnosis of galactorrhea, prolactinoma, visual impairment and diagnosis of infertility in males and females.
